来自加州大学旧金山分校马森实验室的故事

亚历山大·马森（Alexander Marson）教授领导的加州大学旧金山分校实验室旨在深入探究控制免疫细胞行为和特性的基因程序，特别关注T细胞。利用基因工程策略，该实验室致力于更深入地了解免疫细胞功能，并指导T细胞的修饰，以为广泛的人类疾病提供未来细胞疗法的可能性。

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我们需要能用在一项临床生产过程中的长单链DNA，在这方面，通过与金斯瑞的精彩合作，我们受益匪浅。

- 亚历山大·马森（Alexander Marson）分享于金斯瑞GCE论坛

项目的关键挑战

马森团队一直在开发CRISPR/Cas9编辑工具，以实现对免疫细胞的精确、高效修改，而无需借助病毒载体。他们发现，通过将Cas9核糖核蛋白复合物与DNA有效负载共同电转染至T细胞中，可以有效地插入感兴趣的基因序列。例如，通过替换TCRα和β序列来改写T细胞的特异性。

为了提高非病毒基因插入效率，马森团队对DNA有效负载和Cas9蛋白进行了改进，促进了它们在细胞核中的共定位和传递，或称之为“穿梭”。其中一个重要的改进是采用单链DNA有效负载，这使他们能够规避高水平双链DNA相关的毒性问题。因此，马森团队采用了单链DNA供体模板，实现了对各种T细胞的高效、安全编辑，用于治疗。在当前阶段，团队面临的主要挑战是在符合GMP标准的前提下，实现高质量和可靠的单链DNA大规模生产，以满足临床需求。