Product Description |
萤火虫荧光素酶(firefly luciferase)是一种分子量约为61kD的蛋白,在ATP、镁离子和氧气存在的条件下,可以催化luciferin氧化成oxyluciferin,并发出波长为560 nm左右的化学发光(luminescence)。化学发光可以通过化学发光仪(luminometer)或液闪测定仪进行定量测定。其反应原理如下:
通过把特定靶点的转录调控元件或5’启动子区克隆在luciferase的上游,或把3’-UTR区克隆在luciferase的下游等,构建成报告基因(reporter gene)质粒,然后转染细胞。将荧光素酶转入目的细胞中,可构造出特定靶点的报告系统,研究靶点的调控状态。该方法是信号通路、活性测试、体内示踪等研究的工具,广受科研、医药、检测等领域欢迎,是一种强大的生物学检测手段。
萤火虫荧光素酶报告基因检测试剂盒,可用于测试上述反应生成的化学发光(luminescence)信号。其强大的性能适用于高通量和超高通量的萤光素酶活性检测,对混合和分装条件不敏感,可重复性更高,是高密度微孔板的理想选择,且更易储存。
本试剂盒不提供萤光素酶,仅提供与其反应的其它组分。两者一经混合,即产生化学发光信号,对该发光信号进行分析检测,检测结果即表明受特定靶点调控的报告基因在细胞内的表达量,该结果用于指示与特定靶点相互作用的分子生物活性(Bioactivity)。在药理学(Pharmacology)分析中,因其能直接展示药物作用机理(MOA, mechanism of action),常用于生物药的相对效价(RP, relative potency)测定。鉴于此类检测的稳定性、高信号值、误差小等特点,可广泛应用于药理机制研究、药物发现、质检、批间放行等各个环节。 |
Key Features |
检测方便:即加即测,一步检测,无需洗涤或收集细胞等繁琐过程。
超高灵敏度:分辨率可低至50个细胞(具体根据报告基因表达量差异)。
高稳定性:信号半衰期长至1小时,有效降低检测结果的批间误差。
有效期长:配置后的反应液,室温下避光条件可保存1天,4℃下避光可保存3天。
耐受性好:可耐受各种常见培养液及试剂,对检测信号无影响。如:酚红、10%以内的胎牛血清或小牛血清、2%以内的DMSO或乙醇、常用的盐类或金属离子等等。
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Kit Contents |
组分 |
L00877C-100 (100T) |
L00877C-1000 (1000T) |
底物 (干粉) |
1 瓶 |
1 瓶 |
裂解液 |
10 ml |
100 ml |
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Storage |
检测组分未混合前,可在-20℃下避光保存一年。混合后,可分装后在-80℃保存一年。 |
可广泛应用于药理机制研究、药物发现、质检、批间放行等各个环节。 |
图2. 本试剂盒用于转染萤火虫荧光素酶报告基因的HeLa细胞的检测效果
本产品的检测灵敏度高,线性范围宽。96孔板中,20万个细胞以下都能呈现良好的线性关系。细胞种类、萤光素酶表达水平会影响线性范围,当萤火虫萤光素酶表达量很高时,10万个细胞以下能呈现良好的线性关系。
图1.本试剂盒与国外同类产品的检测效果对比。
该产品使用灵活、操作便捷、检测灵敏度高、测定样品的线性范围宽,性能优于国外主要同类产品。(注:实际信号会因细胞种类、转染效率、检测仪器等的影响而略有差异,图中数据仅供参考。)
For research use only. Not intended for human and animal therapeutic or diagnostic use.