内毒素检测常见问题解答

内毒素是什么？

内毒素是一种复杂的脂多糖（LPS），存在于大多数致病性革兰氏阴性菌的外膜上。即使煮沸30分钟也不会破坏内毒素的稳定性，但它可以被某些强氧化剂（如超氧化物、过氧化物和次氯酸盐）所降解。

如何选择内毒素检测方法？

选择合适的内毒素检测方法前需要考虑三件事：待测样本类型、待测样本对检测的干扰因素以及需要检测的内毒素限值。凝胶法是最简单、应用最广泛的内毒素检测方法，其灵敏度高达0.03EU/mL。显色法则将其灵敏度定义为标准曲线中最低的内毒素浓度，检测结果需要分光光度计来读取。

内毒素的最大允许水平是多少？

一个EU的内毒素大约相当于100 pg的大肠杆菌脂多糖（约105个细菌所产的量）。当人类处于5EU/kg体重的内毒素中就可能会出现症状，这些症状包括但不限于发烧、低血压、心率加快和尿量降低。因此，即使是血液中小剂量的内毒素往往也是致命的。

FDA为在美国销售的药物设定了以下最大允许内毒素水平：

内毒素与内毒素去除树脂的结合会受到其他因素的干扰吗？

会的。其他去垢剂和高水平的离液剂（尿素和胍）会降低多粘菌素B对LPS的亲和力。BSA等蛋白质也可以通过与内毒素紧密结合降低内毒素与内毒素去除树脂的相互作用和结合能力。这种结合能力的降低有时可以通过增加固定化多粘菌素B的操作来缓解。然而，一些蛋白质可以在不抑制内毒素与树脂结合的情况下与内毒素紧密结合。这样，蛋白质将与内毒素一同与内毒素去除树脂结合，可能会导致目标蛋白质的损失。